三优生物 1分钟了解系列|如何判断蛋白制备难度之糖基化位点篇
引言
在科学研究以及制药研发领域,常常需要制备一些蛋白。而在进行蛋白制备之前,需要开展一系列分析工作,以便选择适宜的制备方案,进而提高制备的成功率。蛋白分析通常要从蛋白的种属、类型、结构以及理化和生化性质等方面着手。目前,对于蛋白制备难度的评判尚无确切标准。为此,我们从Uniprot数据库中提取了7种哺乳动物(Human、Mouse、Rat、Rabbit、Bovine、Pig、Sumatran orangutan)的56547个蛋白的数据,在氨基酸水平上,对氨基酸个数、糖基化位点等信息进行了分析,旨在给科学家在判断蛋白制备难度时提供参考。
我们经过对这些数据进行分析处理后,将符合“氨基酸个数小于等于100或大于等于1000;糖基化位点数大于等于4或百分比大于等于1.0%”任一性质的蛋白判定为制备难度高的蛋白。具体分析如下:
氨基酸个数
我们统计了56547个蛋白,合计氨基酸总个数为29793248,平均每个蛋白的氨基酸个数为527。
氨基酸个数分布见图1,氨基酸蛋白个数区间及百分比见表1。
▲ 图1. 氨基酸个数分布图
▼ 表1. 氨基酸蛋白个数区间及百分比
糖基化位点&占比
据统计,无糖基化位点蛋白数占比为78.50%,含0-3个糖基化位点蛋白数占比92.97%,95.30%的蛋白糖基化位点占比位于0-1.0%区间。
糖基化位点数分布见图2,糖基化位点百分比分布见图3,糖基化位点百分比数据见表2。
▲ 图2. 糖基化位点分布图
▲ 图3. 糖基化位点百分比分布图
▼ 表2. 糖基化位点百分比
小结
通过对Uniprot上7种哺乳动物的56547个蛋白进行数据分析获得:
· 蛋白的氨基酸个数:每个蛋白平均氨基酸个数为527,86.22%的蛋白氨基酸个数位于101-1000区间;
· 糖基化位点数:无糖基化位点蛋白数占比为78.50%,0-3个糖基化位点蛋白数占比92.97%;
· 糖基化位点数百分比:95.30%的蛋白糖基化位点占比位于0-1.0%区间。
综合以上数据及分析,我们将符合以下任一性质的蛋白判定为制备难度高的蛋白:
注:由于蛋白的多样性及其他多方面因素的影响,以上判断条件仅为概率上分析,不是必然结果,仅供参考。
关于三优生物
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